Sähköforeesigeeliin on muunnelma elektroforeesin vyöhykkeiden .
Tätä elektroforeesitekniikkaa käytetään laajalti biokemiassa tai molekyylibiologiassa , jotta molekyylit voidaan erottaa niiden varauksen, koon (kutsutaan molekyylipainoksi ) tai molempien mukaan samanaikaisesti saattamalla ne siirtymään geelin läpi käyttämällä sähkökenttää . Geeli täytetään suolaliuoksella, useimmiten puskuroidulla vesifaasilla , jonka ionit toimivat elektrolyyttinä ja johtavat virtaa . Analysoidut molekyylit kulkeutuvat geelissä sähkökentän kohdistaman voiman ja geelimatriisin aiheuttamien kitkavoimien yhteisvaikutuksessa.
Tärkeimmät käytetyt geelit ovat agaroosigeeli ja polyakryyliamidigeeli (PAGE).
Erotustasojen lukumäärästä riippuen geelielektroforeesi voi olla yksi- tai kaksiulotteinen .
Elektroforeesi voidaan tehdä luonnollisissa olosuhteissa tai denaturoivissa olosuhteissa . Tässä toisessa tapauksessa puhumme gradienttigeelielektroforeesin denaturoinnista . Luonnollisissa olosuhteissa kunnioitetaan molekyylin rakennetta, kun taas denaturointiehdot denaturoivat molekyylejä puskuriin lisätyn denaturointiaineen ansiosta.
Geelielektroforeesin parametreja säätämällä voidaan työskennellä:
Tätä tekniikkaa voidaan käyttää analyyttisiin tai valmisteleviin tarkoituksiin. Jälkimmäisessä tapauksessa sitä käytetään pääasiassa aminohappojen , proteiinien tai nukleiinihappojen ( DNA tai RNA ) erottamiseen .
Molekyyli | Päägeelityypit | Denaturoiva aine denaturoivan gradienttigeelielektroforeesin tapauksessa |
---|---|---|
Proteiinien elektroforeesi | Polyakryyliamidi | Pinta -ionisia tai ionisia, kuten natriumdodekyylisulfaatti (SDS) polyakryyliamidigeelielektroforeesi (SDS-PAGE) |
Nukleiinihappojen geelielektroforeesi (in) | Agaroosi tai polyakryyliamidi | Kaotrooppisen aineen , kuten urean |