Komplementin kiinnitystesti

Komplementtifiksaatioreaktiotesti on testi immunologinen lääkärin, jota voidaan käyttää havaitsemaan vasta-aineiden spesifinen antigeeni on seerumissa potilaan, riippuen siitä, onko vahvistamisesta komplementin tapahtuu tai ei. Sitä on käytetty laajalti infektioiden diagnosointiin, erityisesti mikrobeilla, joita ei ole helppo havaita viljelymenetelmillä, ja reumaattisissa sairauksissa. Kliinisissä diagnostisissa laboratorioissa se on kuitenkin suurelta osin korvattu muilla serologisilla menetelmillä, kuten ELISA: lla ja patogeenin DNA: n, erityisesti PCR : n, havaitsemiseen perustuvilla menetelmillä .

Klassinen menetelmä: testi vasta-aineiden läsnäololle

Komplementti järjestelmä on järjestelmä, seerumin proteiineja, jotka reagoivat antigeeni-vasta-aine- kompleksit. Jos tämä reaktio tapahtuu solun pinnalla, se johtaa kalvojen läpi muodostuvien huokosien muodostumiseen ja siten solun tuhoutumiseen. Komplementin kiinnitystestin perusvaiheet ovat seuraavat:

  1. seerumi otetaan potilaasta;
  2. potilaiden seerumissa on luonnollisesti erilaisia ​​komplementiproteiineja. Tämän testin mahdollisten vaikutusten hylkäämiseksi potilaan seerumissa olevat komplementtiproteiinit on tuhottava ja korvattava tunnetulla ja standardoidulla määrällä komplementtiproteiineja;
    1. seerumia kuumennetaan siten, että kaikki sen sisällä olevat komplementtiproteiinit, mutta yksikään vasta-aineista, tuhoutuu. Tämä on mahdollista, koska komplementtiproteiinit ovat paljon herkempiä lämmön tuhoutumiselle kuin vasta-aineet ,
    2. seerumiin lisätään tunnettu ja standardoitu määrä komplementtiproteiineja. Nämä proteiinit saadaan usein marsun seerumista ,
  3. antigeeni kiinnostavia lisätään seerumi;
  4. ja punasolujen (RBC) lampaan, jotka on ennalta sidottu anti-punasolu-vasta-aineita lisätään lampaan seerumia. Testi katsotaan negatiiviseksi, jos liuos muuttuu vaaleanpunaiseksi ja muuten positiiviseksi.

Positiivinen potilas  : Jos potilaan seerumi sisältää vasta-aineita kiinnostavaa antigeeniä vastaan, ne sitoutuvat antigeeniin vaiheessa 3 muodostamaan antigeeni-vasta-ainekomplekseja. Komplementtiproteiinit reagoivat näiden kompleksien kanssa ja kuluvat loppuun. Siten, kun vasta-aine-GR-kompleksit lisätään vaiheessa 4, seerumissa ei ole enää komplementtia ja GR pysyy ehjänä putken pohjassa.
Negatiivinen potilas  : jos vasta-ainetta ei ole kiinnostavaa antigeeniä vastaan, komplementti ei ehty ja se reagoi vaiheessa 4 lisättyjen vasta-aine-GR-kompleksien kanssa, mikä johtaa punasolujen hajoamiseen, jotka kaatavat niiden sisällön liuosta, jolloin saadaan vaaleanpunainen liuos.

Testi voidaan suorittaa kvantitatiivisesti asettamalla sarja laimennuksia potilaan seerumista, jotta voidaan määrittää korkein laimennuskerroin, joka antaa positiivisen testin (ei punasolujen hajoamista). Tämä laimennuskerroin vastaa vasta-aineen ”tiitteriä”.

Toinen menetelmä: testaa antigeenin läsnäolo

Vaikka vasta-aineiden havaitseminen on yleisin testimuoto, on myös mahdollista testata antigeenin läsnäolo . Tässä tapauksessa potilaan seerumia täydennetään antigeenille spesifisellä vasta-aineella kompleksien muodostumisen indusoimiseksi. Komplementti- ja vasta-aine-GR-kompleksien lisääminen suoritetaan kuten aiemmin.

Sovellukset

Ihmislääketieteessä

Vasta-aineiden havaitseminen:

Eläinlääketieteessä

Vasta-aineiden havaitseminen:

Katso myös

Aiheeseen liittyvät artikkelit

Ulkoiset linkit

Huomautuksia ja viitteitä

  1. (in) "  Animaatio, joka selittää testikomplementin kiinnityksen periaatetta  " osoitteessa mheducation.com ( katsottu 17. tammikuuta 2016 )